伊人久久大香线蕉影院 I 国产一区在线播放 I 日韩高清一二三区 I 国产蜜臀入口 I 在线播放91先生175d奶少妇 I 国产美女裸身网站免费观看视频 I 成人性生交大片免费观看嘿嘿视频 I 夜鲁夜鲁夜鲁视频在线观看 I 先锋资源久久 I 亚洲经典一区 I 婷婷色综合视频在线观看 I 亚洲欲色欲色xxxxx在线 I 色猫咪免费人成网站在线观看 I 精品91视频 I 国产51视频 I 91在线无精精品一区二区 I 欧美呻吟 I 久久国产精品成人无码网站 I 亚洲天堂午夜 I 在线看91 I 老司机免费的精品视频 I 亚欧美色 I 出差的交换夫妇中文字幕 I 免费的av网站在线观看国产精品 I 一级大片免费看 I 久久婷婷久久 I 精品成人 I 起碰免费公开97在线视频 I 欧美性性享受在线观看 I 免费日韩一区二区

在間接法和夾心法ELSIA中，陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)賽法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。兩類(lèi)反響的成果判別辦法不一樣，分述于下。
（1）間接法和夾心法
這類(lèi)反響的定性成果能夠用肉眼判別。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性，顯色明晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中，正常人血清反響后常可呈現(xiàn)呈色的本底，此本底的深淺因試劑的構(gòu)成和試驗(yàn)的條件不一樣而異，因而試驗(yàn)中有必要加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的構(gòu)成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類(lèi)似物。在用肉眼判別成果時(shí)，更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的目標(biāo)。
目視法簡(jiǎn)捷明晰，但頗具主觀(guān)性。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值，這么能夠得到客觀(guān)的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本（sample，S）、陽(yáng)性對(duì)照（P）、和陰性對(duì)照（N）的吸光值，然后進(jìn)行核算。核算辦法有多種，大致可分為陽(yáng)性斷定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類(lèi)。
a．陽(yáng)性斷定值
陽(yáng)性斷定值（cut-off value）通常為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù)，以此作為判別成果陽(yáng)性或陰性的規(guī)范。
ELISA試劑盒用此法判別成果請(qǐng)求試驗(yàn)條件十分穩(wěn)定，試劑的制備有必要規(guī)范化，陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)契合必定的規(guī)范，須配用精密的儀器，并嚴(yán)厲按規(guī)則操作。陽(yáng)性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的體系中經(jīng)過(guò)對(duì)很多標(biāo)本的試驗(yàn)查看而得到的。現(xiàn)舉某種查看HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先核算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)（NC X ）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（P-N）有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值（例0.400），試驗(yàn)才有用。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其間之一超出此規(guī)模，則棄去，而以另兩個(gè)陰性對(duì)照從頭核算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上規(guī)模，則該次試驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性斷定值按下式核算：
陽(yáng)性斷定值=NCX+0.05
標(biāo)本A值＞陽(yáng)性斷定值的為陽(yáng)性，小于陽(yáng)性斷定值的為陰性。應(yīng)留意的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下，而不是對(duì)各種試劑均可通用。
依據(jù)以上敘說(shuō)能夠看出，在這種辦法中陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控效果，試劑蛻變和操作不妥均會(huì)發(fā)作"試驗(yàn)無(wú)效"的后果。
b.標(biāo)本/陰性對(duì)照比值
在試驗(yàn)條件（包含試劑）較難確保穩(wěn)定的情況下，這種判別法較為適宜。在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的A值后，核算S/N值。也有寫(xiě)作P/N的，這兒的P不代表陽(yáng)性(positive)，而是患者（patient）的縮寫(xiě)，不該誤解。為防止混雜，更宜用S/N表明。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽(yáng)性規(guī)范，現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿襲。實(shí)際上每一測(cè)定體系應(yīng)該用試驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是，N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，致使反響后發(fā)作的本底也許較正常人血清的本底低得多。因而，這類(lèi)試劑盒規(guī)，如N<0.05<>（或別的數(shù)值），則按0.05核算，否則將呈現(xiàn)假陽(yáng)性成果。
（2）競(jìng)賽法
在競(jìng)賽法ELISA中，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反響中酶物的濃度和參加競(jìng)賽按捺物的量，通常調(diào)理陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間，此刻反響zui為靈敏。
競(jìng)賽法ELISA不易用自視判別成果，因肉眼很難區(qū)分弱陽(yáng)性反響與陰性對(duì)照的顯色區(qū)別，通常均用比色計(jì)測(cè)定，讀出S、P和N的吸光值。核算辦法首要也有兩種，即陽(yáng)性斷定值法和按捺率法。
a. 陽(yáng)性斷定值法
與間接法和夾心法中的陽(yáng)性斷定值法根本一樣，但在核算公式中引進(jìn)陽(yáng)性對(duì)照A值，現(xiàn)舉某種查看抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先核算陰性對(duì)照A值的平均值（NC X ）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（N-P）有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值（例如0.300）,試驗(yàn)才有用。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)小于2.000，并且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其間之一超出此規(guī)模，則棄去，而以另2個(gè)陰性對(duì)照從頭核算×NCX；如有2個(gè)陰性對(duì)照A超出以上規(guī)模，則該次試驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性斷定值按下式核算：
陰性斷定值=0.4×NCX+0.6×PCX
標(biāo)本A值≤陽(yáng)性斷定值的反響為陽(yáng)性，A＞陽(yáng)性斷定值的反響為陰性。
b. 按捺率法
按捺率表明標(biāo)本在競(jìng)賽中標(biāo)本對(duì)陰性反響顯色的按捺程度，按下式核算：
按捺率（%）= （陰性對(duì)照A值-標(biāo)本A值）×100%/陰性對(duì)照A值
通常規(guī)則按捺率≥50%為陽(yáng)性，＜50%為陰性。
定量測(cè)定
ELISA試劑盒操作進(jìn)程復(fù)雜，影響反響要素較多，特別是固相載體的包被難到達(dá)各個(gè)別之間的共同，因而在定量測(cè)定中，每批測(cè)驗(yàn)均須用一系列不一樣濃度的參閱規(guī)范品在一樣的條件下制造規(guī)范曲線(xiàn)。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，規(guī)范曲線(xiàn)的規(guī)模通常較寬，曲線(xiàn)zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，制作時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以查看物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線(xiàn)通常呈S形，其頭、尾部曲線(xiàn)趨于平整，中心較呈直線(xiàn)的有些是的查看區(qū)域。
測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)賽法，其規(guī)范曲線(xiàn)中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。規(guī)范曲線(xiàn)的形狀因試劑盒所用形式的不同而略有不一樣。